重組質(zhì)粒pcr的假陽性
在轉(zhuǎn)化板上挑取單克隆，液體培養(yǎng)后提取質(zhì)粒。
奇怪的是電泳顯示沒有提取到條帶，都是彌散的。
用這樣的“質(zhì)粒”樣品做pcr驗證，得到了很亮的目的條帶
想請問大家，是假陽性的概率大不大？
為什么會造成這樣的結(jié)果呢？
ps：插入的目的片段是個小片段。
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謝謝樓上的建議 就是酶切連接轉(zhuǎn)化都重新做么？
因為轉(zhuǎn)化菌長的慢，所以自己也很不確定，平板是剛做的，怎樣控制強的篩選壓力呢
，
你的質(zhì)粒提取完成后跑膠，最好出現(xiàn)三條帶，離點樣孔最近的的是提取過程中破碎的片段，依次是開環(huán)產(chǎn)物，跑的最快的環(huán)狀質(zhì)粒也是你所需要的。
哪一條才是與理論值最接近的呢？