DNA的沉淀問(wèn)題
DNA(CTAB法大量提取,用于Southern雜交)用無(wú)水乙醇(或異丙醇)沉淀,發(fā)現(xiàn)有兩種形態(tài),一是DNA抱成團(tuán)狀,可用剪頭移液槍轉(zhuǎn)移;另一則是成散絮狀(碎片狀),只能用離心的方法得到沉淀;
誰(shuí)能解釋一下不同形態(tài)形成的原因?是否與DNA濃度、質(zhì)量、以及材料處理方法有關(guān)?
本人今年一月份所沉的DNA均呈團(tuán)狀,而最近提的卻既有團(tuán)狀又有碎片狀,有一次甚至都是碎片狀。
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
這個(gè)應(yīng)該不會(huì)!研磨程度再高,而不足以損害大分子物質(zhì)!
不過(guò)后續(xù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),DNA純度受到一定的影響
現(xiàn)在看來(lái)主要是純度問(wèn)題,溶解DNA時(shí)發(fā)現(xiàn)有大量變性蛋白混入!
估計(jì)是 1、抽提時(shí)過(guò)于小心,未抽提完全
2 、抽提離心后吸液時(shí),吸到了中間層
3、利用離心的方法獲得沉淀,會(huì)是一些雜質(zhì)也混入
第二遍抽提時(shí)抽提力度增加,洗液量減少,發(fā)現(xiàn)原來(lái)六管沉后又全呈團(tuán)狀了
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恭喜樓主實(shí)驗(yàn)成功,學(xué)習(xí)了