【討論】清洗受污染的色譜柱,為何要用異丙醇?
前些時(shí)候,回帖建議蟲友用異丙醇沖洗反相色譜柱。斑竹問我,為何要用異丙醇。
咳咳,平時(shí)不求甚解,所以一下子也答不上原因。
后來查了些資料,分享一下:
首先,異丙醇特殊的溶解性,異丙醇能和乙酸、丙酮、乙腈、苯、丁醇、四氯化碳、氯仿、環(huán)己烷、二氯甲烷、DMF、DMSO、乙酸乙酯、乙醇、二乙醚、正己烷、甲醇、THF、甲苯、水、二甲苯等液相可能用到的幾乎所有的溶劑混溶;烊鼙壤,不深究。
其次,使用流動相時(shí),若溶劑的混溶性不好甚至不混溶,會形成乳化的小液滴,毀壞色譜柱。
由此可得知,異丙醇具有某些特點(diǎn):“去污能力”強(qiáng);不傷色譜柱。以它作為過渡溶劑和清洗受污染的色譜柱及液相配件,情理之中了。
注:異丙醇粘度大,會使壓力上升。
另附被污染的正相、反相色譜柱的清洗方法。
反相色譜柱(C18、C8):
水/乙腈95/5
→100%乙腈
→乙腈/異丙醇75/25
→100%異丙醇
→100%二氯甲烷
→100%己烷
(若需用到二氯甲烷、己烷,使用反相流動相前需用異丙醇過渡)
(根據(jù)污染物性質(zhì),選擇合適的沖洗溶劑及程序)
正相色譜柱(SiO2、Diol):
甲醇/三氯甲烷50/50→100%乙酸乙酯
還請各位多多交流,指點(diǎn)。
返回小木蟲查看更多
今日熱帖
京公網(wǎng)安備 11010802022153號
不要需按反方向在沖洗回來嗎?
二氯甲烷何解
反方向,一般情況下都不用的。反沖對色譜柱柱效影響不好。
對于一些強(qiáng)保留組分,若異丙醇不能清洗干凈,可以嘗試使用二氯甲烷。異丙醇極性4.3,二氯甲烷3.4
,
要反向沖洗的
反沖對柱效不好。
學(xué)習(xí)了,總結(jié)的挺好的