【討論】清洗受污染的色譜柱,為何要用異丙醇?
前些時(shí)候,回帖建議蟲(chóng)友用異丙醇沖洗反相色譜柱。斑竹問(wèn)我,為何要用異丙醇。
咳咳,平時(shí)不求甚解,所以一下子也答不上原因。
后來(lái)查了些資料,分享一下:
首先,異丙醇特殊的溶解性,異丙醇能和乙酸、丙酮、乙腈、苯、丁醇、四氯化碳、氯仿、環(huán)己烷、二氯甲烷、DMF、DMSO、乙酸乙酯、乙醇、二乙醚、正己烷、甲醇、THF、甲苯、水、二甲苯等液相可能用到的幾乎所有的溶劑混溶;烊鼙壤,不深究。
其次,使用流動(dòng)相時(shí),若溶劑的混溶性不好甚至不混溶,會(huì)形成乳化的小液滴,毀壞色譜柱。
由此可得知,異丙醇具有某些特點(diǎn):“去污能力”強(qiáng);不傷色譜柱。以它作為過(guò)渡溶劑和清洗受污染的色譜柱及液相配件,情理之中了。
注:異丙醇粘度大,會(huì)使壓力上升。
另附被污染的正相、反相色譜柱的清洗方法。
反相色譜柱(C18、C8):
水/乙腈95/5
→100%乙腈
→乙腈/異丙醇75/25
→100%異丙醇
→100%二氯甲烷
→100%己烷
(若需用到二氯甲烷、己烷,使用反相流動(dòng)相前需用異丙醇過(guò)渡)
(根據(jù)污染物性質(zhì),選擇合適的沖洗溶劑及程序)
正相色譜柱(SiO2、Diol):
甲醇/三氯甲烷50/50→100%乙酸乙酯
還請(qǐng)各位多多交流,指點(diǎn)。
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
反向沖洗是指將流動(dòng)相從正己烷沖回二氯甲烷、異丙醇等等再回到水
哦,明白你的意思了,但這樣也得先用異丙醇過(guò)渡,反沖后,再用異丙醇過(guò)渡至水相。
很好,謝謝樓主!
學(xué)習(xí)了,呵呵
受教。。!
大俠:
你好,我想問(wèn)一下,我用異丙醇0.3ml沖了四五個(gè)小時(shí)吧,雖然柱壓下降,但是還是高,如果用二氯甲烷沖會(huì)不會(huì)吧C18鍵沖斷呀?
謝謝
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不會(huì)的,不過(guò)用二氯甲烷沖過(guò)后,記得先換異丙醇過(guò)渡,再換上反相流動(dòng)相。
謝謝大俠