DNA 變性與退火
有誰了解 ssDNA 高溫變性 緩慢降到室溫 以及 高溫變性后 立即降到4度 保持一段時間 兩種方式效果有什么不同？我的目標是ssDNA與相應(yīng)的靶向分子或是蛋白相結(jié)合時，采用哪一種方式使得結(jié)合更有效呢？謝謝
[ Last edited by 海闊天空102 on 2012-12-5 at 17:20 ]
返回小木蟲查看更多
今日熱帖
猜你喜歡
板塊導(dǎo)航
- 網(wǎng)絡(luò)生活
- 資源共享
- 化學(xué)化工
- 專業(yè)學(xué)科
- 科研生活
- 生物醫(yī)藥
- 材料
- 計算模擬
- 學(xué)術(shù)交流
- 出國留學(xué)
- 注冊執(zhí)考
24小時熱帖
換一批
- 下載小木蟲APP
- 與700萬科研達人隨時交流
-
二維碼
-
IOS
-
安卓
京公網(wǎng)安備 11010802022153號
為什么要采用這兩種降溫方法？目的何在？
哪種結(jié)合更有效，可以直接實驗表現(xiàn)出來不？
樓主，我以外行人，但是旁觀的心態(tài)提的問題，僅供參考哈
dna是用作是配體吧？一般都是室溫退火呢，還是頭一次聽說要放到四度。樓主自己實驗一下不就清楚了么。
目的是更有效的結(jié)合，但目前沒有發(fā)現(xiàn)特異性的結(jié)合，所以在考慮是什么原因。想到了DNA結(jié)構(gòu)是不是需要activation，才能更有效的結(jié)合。問一下原理性或是經(jīng)驗性的知識
，
什么叫室溫退火，是不是高溫緩慢降到室溫？本人不是學(xué)生物的，
我做的時候95攝氏度變性，然后室溫放置一小時。如果樓主做的是可以和蛋白特異性偶聯(lián)的配體的話不妨多放一會兒，兩個小時怎么都夠了。
ssDNA 高溫變性 緩慢降到室溫 有利于形成二級結(jié)構(gòu)
立即降到4度 防止形成二級結(jié)構(gòu)，多用于雙鏈DNA變性后產(chǎn)生單鏈DNA
緩慢降溫有利于復(fù)性 形成二級結(jié)構(gòu)等，迅速降溫不利于復(fù)性，你可以參看王鏡巖《生物化學(xué)》核酸性質(zhì)那一章節(jié)相關(guān)內(nèi)容。
你的實驗是要ssDNA, 所以建議你采用迅速降溫方式處理人的ssDNA.祝好！