DNA 變性與退火
有誰(shuí)了解 ssDNA 高溫變性 緩慢降到室溫 以及 高溫變性后 立即降到4度 保持一段時(shí)間 兩種方式效果有什么不同?我的目標(biāo)是ssDNA與相應(yīng)的靶向分子或是蛋白相結(jié)合時(shí),采用哪一種方式使得結(jié)合更有效呢?謝謝
[ Last edited by 海闊天空102 on 2012-12-5 at 17:20 ]
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有誰(shuí)了解 ssDNA 高溫變性 緩慢降到室溫 以及 高溫變性后 立即降到4度 保持一段時(shí)間 兩種方式效果有什么不同?我的目標(biāo)是ssDNA與相應(yīng)的靶向分子或是蛋白相結(jié)合時(shí),采用哪一種方式使得結(jié)合更有效呢?謝謝
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
我用的是可以binding蛋白的適配體 即單鏈DNA,目的是能有效bingding蛋白,那為什么迅速降溫比較好呢?
簡(jiǎn)單地說(shuō)就是緩慢降溫DNA還可以雜交,迅速降溫就幾乎不可以了。就是復(fù)性的問(wèn)題
https://baike.baidu.com/view/1017120.htm復(fù)性的解釋
人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體原裝(ssDNA)ELISA試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng),免費(fèi)代測(cè)。
上海雅吉生物科技有限公司提供各種種屬、各種系列ELISA試劑盒。產(chǎn)品主要用于科研方面而不用于臨床診斷,各種標(biāo)本、種屬、具體指標(biāo)齊全,種屬類(lèi)有:人、家畜類(lèi)、水產(chǎn)類(lèi)、禽類(lèi)、寵物類(lèi)、植物類(lèi)等,如人、大鼠、小鼠、大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)Elisa試劑盒
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標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本
放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封
袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)
本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的
OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(n/5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
特別和注意:ssDNA 高溫變性 緩慢降到室溫 有利于形成二級(jí)結(jié)構(gòu)
立即降到4度 防止形成二級(jí)結(jié)構(gòu),多用于雙鏈DNA變性后產(chǎn)生單鏈DNA,