qPCR每個(gè)孔加多少cDNA怎么確定
做了內(nèi)參和研究對象的qPCR標(biāo)準(zhǔn)曲線，接下來怎么確定我對照組和實(shí)驗(yàn)組每個(gè)孔各加多少cDNA合適呢？
我只是為了確定delta delta CT
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號
每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的體系不太一樣，和試劑也有關(guān)，你可以自己優(yōu)化做適合的體系
10 - 100 ng，根據(jù)基因豐度而定。
樓主的實(shí)驗(yàn)樣本要是同一批處理進(jìn)行了提RNA反轉(zhuǎn)錄同樣RNA樣品的話，可以挑選其中一個(gè)反轉(zhuǎn)錄過后的cDNA樣品做一個(gè)濃度的稀釋梯度，先跑一遍看看內(nèi)參基因的Ct值，選取合適的稀釋濃度，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)即可，祝好運(yùn)~~，