連接載體酶切位點(diǎn) SnaBI 和NotI連接效率
如題，準(zhǔn)備引入 SnaB I 和 Not I 兩個(gè)酶切位點(diǎn)，并采用takarra的QuickCut限制酶進(jìn)行酶切，之后連接至ppic9k。
想請(qǐng)問(wèn)做過(guò)的前輩，SnaB I 是平末端，Not I 是粘性末端，連接效率高不？實(shí)在不行可否先酶連SnaB I，之后用PCR純化試劑盒純化完畢再進(jìn)行Not I端酶連？
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快來(lái)小伙伴答題呀，送金幣了
為什么不采用infusion或者Gibson來(lái)做 感覺(jué)會(huì)方便許多 平末端的連接一直都低效率的 用quickligase可能會(huì)效率好些
對(duì)的 我猜你說(shuō)的DH5a是某種感受態(tài)細(xì)胞
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朋友，我們可以換一下質(zhì)粒嗎？我現(xiàn)在需要pPIC9K，謝謝你。
直接加同源臂用無(wú)縫克隆做了。