大家好，
    想請教個(gè)問題，我根據(jù)某個(gè)物種的重測序結(jié)果，想篩選引物，以篩選某個(gè)性狀。比如，兩個(gè)果實(shí)甜澀的性狀，目前篩到了某個(gè)引物，在甜味果實(shí)中應(yīng)該有這段序列，在澀味果實(shí)中，該序列理論上應(yīng)該是沒有的。。
   現(xiàn)在出現(xiàn)的問題是，我用這個(gè)引物PCR后，跑瓊脂糖電泳發(fā)現(xiàn)，甜味果實(shí)DNA的PCR條帶很亮，而澀味果實(shí)DNA的PCR條帶也是有的，但是很暗很暗，兩個(gè)條帶的亮暗差異很明顯。我做了多個(gè)重復(fù)，即提了多個(gè)DNA，結(jié)果都是甜味果實(shí)PCR條帶很亮，澀味果實(shí)PCR條帶特別暗。
   問題如下，
    1， 我提的DNA濃度什么的基本是差不多的，可是為什么一個(gè)條帶很暗一個(gè)條帶很亮呢。。
    2， 理論上應(yīng)該一個(gè)條帶有，另一個(gè)沒有條帶。目前發(fā)現(xiàn)一個(gè)條帶很暗一個(gè)條帶很亮。既然都有條帶，那這是不是說明，這個(gè)引物效果不好，不能用于篩選這個(gè)甜澀性狀？
   3，如果DNA濃度差不多，但是電泳條帶一個(gè)亮，一個(gè)暗，可以不可以說，亮條帶的那個(gè)果實(shí)的該基因表達(dá)量高，暗條帶的那個(gè)果實(shí)的該基因表達(dá)量低？ 返回小木蟲查看更多