抗原同其抗體的偶聯(lián)方法
各位同仁好,
最近在設計試驗的遇到一個問題,不知道該怎么解決,特向有經(jīng)驗的同行請教,感謝大家的回復!
我的問題是:我有一個心肌肌鈣蛋白I的全長抗原(真核表達、原核表達都有),也有多種抗心肌肌鈣蛋白I的單抗,現(xiàn)在我想把心肌肌鈣蛋白I的抗原和抗心肌肌鈣蛋白I的抗體通過化學方法共價偶聯(lián),得到一個抗原-抗體偶聯(lián)物,作為其他項目的一種質(zhì)控品?梢栽趺床僮髂兀
我的想法是:
1、先將抗體的抗原結(jié)合區(qū)域切除,再進行偶聯(lián),但是可能存在切除不完全,也會喪失某些表位;
2、通過某種試劑對可變區(qū)進行封閉,然后偶聯(lián),偶聯(lián)完成再將封閉位點釋放,但是我不知道有沒有這樣的試劑,釋放后會不會有自行結(jié)合了,可不可行,會不會對蛋白產(chǎn)生不好的影響;
3、不理會抗原抗體的結(jié)合,保證抗原/抗體中的某一種嚴重過量,按照偶聯(lián)過程進行操作,偶聯(lián)物過層析柱純化,層析柱可以特異性結(jié)合耦聯(lián)試劑(偶聯(lián)試劑為小分子,純化前經(jīng)過透析除去),但是可行性未知。
以上均為個人想法,尚未付諸實施,不知道是否有大神進行過相關(guān)操作,能否指點一二,感激不盡!
返回小木蟲查看更多
今日熱帖
京公網(wǎng)安備 11010802022153號
支持
,
祝福