各位同仁好，

最近在設(shè)計(jì)試驗(yàn)的遇到一個(gè)問題，不知道該怎么解決，特向有經(jīng)驗(yàn)的同行請(qǐng)教，感謝大家的回復(fù)！

我的問題是：我有一個(gè)心肌肌鈣蛋白I的全長(zhǎng)抗原（真核表達(dá)、原核表達(dá)都有），也有多種抗心肌肌鈣蛋白I的單抗，現(xiàn)在我想把心肌肌鈣蛋白I的抗原和抗心肌肌鈣蛋白I的抗體通過化學(xué)方法共價(jià)偶聯(lián)，得到一個(gè)抗原-抗體偶聯(lián)物，作為其他項(xiàng)目的一種質(zhì)控品。可以怎么操作呢？
我的想法是：
1、先將抗體的抗原結(jié)合區(qū)域切除，再進(jìn)行偶聯(lián)，但是可能存在切除不完全，也會(huì)喪失某些表位；
2、通過某種試劑對(duì)可變區(qū)進(jìn)行封閉，然后偶聯(lián)，偶聯(lián)完成再將封閉位點(diǎn)釋放，但是我不知道有沒有這樣的試劑，釋放后會(huì)不會(huì)有自行結(jié)合了，可不可行，會(huì)不會(huì)對(duì)蛋白產(chǎn)生不好的影響；
3、不理會(huì)抗原抗體的結(jié)合，保證抗原/抗體中的某一種嚴(yán)重過量，按照偶聯(lián)過程進(jìn)行操作，偶聯(lián)物過層析柱純化，層析柱可以特異性結(jié)合耦聯(lián)試劑（偶聯(lián)試劑為小分子，純化前經(jīng)過透析除去），但是可行性未知。


以上均為個(gè)人想法，尚未付諸實(shí)施，不知道是否有大神進(jìn)行過相關(guān)操作，能否指點(diǎn)一二，感激不盡！ 返回小木蟲查看更多