求助蛋白純化��！蛋白過不下來怎么辦呀！
目的蛋白分子量53Kd，等電點(diǎn)5.05，ph7.2-7.4最穩(wěn)定，我用36-86mmol/l NaH2PO4緩沖液洗脫的！ph調(diào)的 7.3 但是都沒有條帶，是怎么回事啊。上樣前的有目的條帶！過了柱子就沒有！
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不應(yīng)該結(jié)合在柱子上嗎，用緩沖液就能洗下來？？？你用什么純化的��？
，
如果是6×his標(biāo)簽的，應(yīng)該要用咪唑才能置換沖洗下來
如果是融合了GST-Tag的，要用谷胱甘肽（GSH）沖洗下來
過離子柱？ 36-86mmol/l NaH2PO4緩沖液，換成36-500mMNaH2PO4緩沖液試試看