酶切連接不成功
酶切連接總是沒有陽(yáng)性子,我的基因是菌p得來(lái)的,三個(gè)基因,我用overlap連起來(lái)總長(zhǎng)3900bp,載體是petduet-1,酶切位點(diǎn)ecor1和hind3做了一個(gè)多月了,試過(guò)各種連接比例。我現(xiàn)在在想會(huì)不會(huì)是我目的基因有什么問題?
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酶切連接總是沒有陽(yáng)性子,我的基因是菌p得來(lái)的,三個(gè)基因,我用overlap連起來(lái)總長(zhǎng)3900bp,載體是petduet-1,酶切位點(diǎn)ecor1和hind3做了一個(gè)多月了,試過(guò)各種連接比例。我現(xiàn)在在想會(huì)不會(huì)是我目的基因有什么問題?
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
多片段連接可用無(wú)縫克隆一步與線性化載體構(gòu)建重組質(zhì)粒
樓上正解,我們用的諾唯贊的多片段同源重組酶,基本一次成功。(此處不是廣告)
或者試試AQUA cloning?
感覺和我們以前實(shí)驗(yàn)室遇到問題很像,各種連不上,更多情況都是不長(zhǎng)
不考慮給點(diǎn)代言費(fèi)嗎
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