單克隆抗體制備方法上的一點(diǎn)困惑
本人非生物專(zhuān)業(yè),最近學(xué)習(xí)抗體相關(guān)知識(shí),遇到如下問(wèn)題,還希望專(zhuān)業(yè)人士給解惑:
抗體制備的方法一:
B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、HAT培養(yǎng)基培養(yǎng)、雜交瘤細(xì)胞的篩選及克隆、小鼠腹水/體外培養(yǎng)制得單克隆抗體。
方法二、該方法涉及到細(xì)胞株構(gòu)建議,流程則是細(xì)胞株構(gòu)建(具體涉及到載體構(gòu)建、轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞)、蛋白表達(dá)、抗體純化。
有點(diǎn)暈,上述都涉及的是單抗的制備,總感覺(jué)有什么關(guān)聯(lián),但又理不清楚,希望高人指點(diǎn):
方法二是在拿到單抗的序列結(jié)構(gòu)以后,根據(jù)它的序列經(jīng)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞讓其表達(dá)?
還是說(shuō)其它的解釋?zhuān)?span style="margin-left:5px; font-size: 12px;">
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我覺(jué)得樓主理解的是正確的,我理解的第一種方法是相當(dāng)于是將已免疫的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)的方式配合一定的培養(yǎng)基來(lái)篩選抗體,然后再純化出來(lái),第二種方式相當(dāng)于是利用基因工程的方式在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),然后得到細(xì)胞表達(dá)的抗體。
好的,謝謝
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