重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化不長菌
我做的重組質(zhì)粒，把1000bp的基因片段連接到5.3kb的pet26b載體上，轉(zhuǎn)化到Origami2大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞，用的加了抗生素的LB平板，不長菌是怎么回事呀？做了對(duì)照：空載體直接轉(zhuǎn)化，涂到抗生素平板，也是不長菌；但是涂到?jīng)]加抗生素的平板上長了一堆密密麻麻的小菌落，到底咋回事呀？
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是不是抗性弄錯(cuò)了呀
時(shí)間放長一點(diǎn)。一般來說大腸桿菌8到10個(gè)小時(shí)菌斑就很大了，但是有的基因轉(zhuǎn)化進(jìn)去后會(huì)導(dǎo)致菌落生長緩慢。我當(dāng)年有個(gè)基因構(gòu)建載體到大腸桿菌感受態(tài)后，需要3~5天才能長出正常大小的菌斑，當(dāng)時(shí)一度以為是雜菌，構(gòu)建了2個(gè)月，后來發(fā)現(xiàn)就是這么慢，導(dǎo)致開始生長緩慢覺得平板上完全沒有生長，
你要不就用卡那單抗試試？還是已經(jīng)試過了也沒長....
化轉(zhuǎn)后重旋的菌液分開涂兩個(gè)單抗板，篩下哪個(gè)板有問題？