Cas12a-crRNA復合體切割熒光報告分子，最后體系中的熒光強度也太不穩(wěn)定了，求助是哪里出了問題？
具體過程就是先核算恒溫擴增，然后cas12a-crRNA復合體識別擴增產物并切割熒光報告分子。
操作在冰上進行，已經盡量控制每管的擴增時間和切割時間相同了。而且我是把其他試劑先混合后再分裝與靶標核酸孵育反應的。
最后用qPCR儀測熒光，每次差距都特別大。我做了好多次，取其中最接近的三次結果做了誤差棒，如圖，還是很差。求助這是怎么回事兒��？

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