NEB的BpuEI酶,1ul酶切不開(kāi)1ug的質(zhì)粒,多加酶也沒(méi)用,求大神指導(dǎo) 返回小木蟲(chóng)查看更多
看看溫度對(duì)不對(duì)
可以增加一下酶切時(shí)間試試,NEB的內(nèi)切酶建議的酶切時(shí)間是37°C,30 min,但我們往往會(huì)選擇酶切1h,如果實(shí)在很難切開(kāi)的話,可以延長(zhǎng)至4 h或過(guò)夜
會(huì)不會(huì)是酶切位點(diǎn)不對(duì),如何判斷酶沒(méi)有切開(kāi)質(zhì)粒的呢
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看看溫度對(duì)不對(duì)
可以增加一下酶切時(shí)間試試,NEB的內(nèi)切酶建議的酶切時(shí)間是37°C,30 min,但我們往往會(huì)選擇酶切1h,如果實(shí)在很難切開(kāi)的話,可以延長(zhǎng)至4 h或過(guò)夜
37℃沒(méi)問(wèn)題
A260/A280,A260/A230兩個(gè)比值正常,難道是殘留雜質(zhì)影響
謝謝,都已試效果一般
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會(huì)不會(huì)是酶切位點(diǎn)不對(duì),如何判斷酶沒(méi)有切開(kāi)質(zhì)粒的呢