急!!兩種質(zhì)粒共轉(zhuǎn)BL21問題,請高手支招!
各位請問兩種質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)化表達菌株BL21(DE3)為什么誘導(dǎo)不出帶來呢?復(fù)制子不一樣,抗性不一樣,菌液pcr都有帶,用的PH8.0 Tris HCl 裂解菌體,BL21 condon 稀有密碼子對照菌株同樣結(jié)果,一個蛋白誘導(dǎo)出來了,想要的目的蛋白沒有誘導(dǎo)出來,實在想不通,目前正在將兩種蛋白互換標(biāo)簽(PS:小木蟲為什么不能發(fā)picture)
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號
請問你的問題解決了嗎?我現(xiàn)在遇到了同樣的問題,方便的話能不能私信一下我,我們互加一下微信討論一下?謝謝!
我也想問一下,我在BL21DE3中共轉(zhuǎn)了pET28a和pET22b,我兩個蛋白都表達了。但是,我老師說這是不可以的。因為復(fù)制子一樣的情況下,質(zhì)粒不能共存?墒,我在培養(yǎng)基中添加了兩種抗生素,難道不應(yīng)該可以共存嗎?
之前有理論說,如果復(fù)制子一樣的兩個質(zhì)粒在同一宿主菌內(nèi)會不兼容。
但是后面也有人發(fā)文章,說同樣的pET質(zhì)粒,不同抗性也可以表達出蛋白(因為抗性篩選壓力吧)
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我想請教一下,共同轉(zhuǎn)化后涂板長菌也是16h嗎,因為我試過共轉(zhuǎn)化很多次,但在涂板后都沒長菌