酶容易降低酶活怎么辦？
用大腸桿菌表達胞內酶，每次都是從-80℃劃線后再培養(yǎng)的，但發(fā)現前幾次實驗酶活還可以，后面重復的時候發(fā)現酶活降低了很多，培養(yǎng)條件都是一樣的……很是惆悵……
有大佬了解是什么原因嗎？還有，大腸桿菌菌體如果放冰上過夜再破壁的話，會對酶活有影響嗎？
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大腸桿菌冰上過夜會對酶活有影響。很多酶都不穩(wěn)定，隨著凍融或放置活性會降低。
酶活測量是用菌液還是純化后的蛋白？如果是菌液的話，最好先定量一下表達水平，不要默認每次表達水平一樣。
純化蛋白盡量在一天內完成，除非需要透析，