解淀粉芽孢桿菌陽性克隆轉接不長
本人現(xiàn)在在做解淀粉芽孢桿菌的轉化來敲除基因組上的基因,轉化之后平板上有單菌落,做菌落PCR后有我的目的條帶,用基因組上的引物進行PCR也可以P出相應的條帶,那應該不是雜菌,我的質粒應該也轉化進去了,但是陽性克隆轉接液體LB之后,長不起來,把單菌落轉接新的LB平板也不長,實在沒有辦法了,希望各位大神不吝賜教,感謝感謝!
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本人現(xiàn)在在做解淀粉芽孢桿菌的轉化來敲除基因組上的基因,轉化之后平板上有單菌落,做菌落PCR后有我的目的條帶,用基因組上的引物進行PCR也可以P出相應的條帶,那應該不是雜菌,我的質粒應該也轉化進去了,但是陽性克隆轉接液體LB之后,長不起來,把單菌落轉接新的LB平板也不長,實在沒有辦法了,希望各位大神不吝賜教,感謝感謝!
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號
屬于假陽性,質粒進去了,但是不能穩(wěn)定復制。
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想請教一下 芽孢桿菌的基因敲除您用的什么方法?
請問下樓主怎么轉化的