HPLC突然出現(xiàn)巨大的雜峰
在測氨基酸的時候,同一個樣品,同樣梯度洗脫,之前不會出現(xiàn)47min的峰的,突然就出現(xiàn)了,之后跑的所有樣品都有這個峰,跑超純水也會出現(xiàn)。是什么原因呢?求求各位大佬指點一下,液相小白好多都不太懂
我使用的流動相是A(鹽)和B(乙腈:水=4:1),最后45min到55min是切換流動相,從0:100到100:0。色譜柱是4.6*150mm的反相C18柱。
想請問一下是什么原因呢?

之前的圖.jpg

47min出現(xiàn)巨大的峰.jpg
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號
衍生方法吧,換下流動相A,看看還會不會出現(xiàn),你色譜柱上有保護柱吧,如果換了流動相A,把保護柱拆下來,直接上柱子,或者換個保護柱上,看看還出不出現(xiàn),
根據(jù)我的經(jīng)驗,這個東西跟濾膜的關(guān)系很大,換濾膜試試,特別時過濾流動相的濾膜
這種雜峰在切換成100%甲醇時非常常見,既然超純水也有,那就不是某種物質(zhì)。不用處理吧。
難以解釋的是以前為何沒有。
45-55min的切換是梯度過程還是突發(fā)過程,或者這么問:你是在45.01min設(shè)置為100:0還是55min設(shè)置為100:0的
上個鬼峰補集柱,大概率能消除或減輕