HPLC突然出現(xiàn)巨大的雜峰
在測(cè)氨基酸的時(shí)候，同一個(gè)樣品，同樣梯度洗脫，之前不會(huì)出現(xiàn)47min的峰的，突然就出現(xiàn)了，之后跑的所有樣品都有這個(gè)峰，跑超純水也會(huì)出現(xiàn)。是什么原因呢？求求各位大佬指點(diǎn)一下，液相小白好多都不太懂
我使用的流動(dòng)相是A（鹽）和B（乙腈：水=4:1），最后45min到55min是切換流動(dòng)相，從0:100到100:0。色譜柱是4.6*150mm的反相C18柱。
想請(qǐng)問(wèn)一下是什么原因呢？
之前的圖.jpg
47min出現(xiàn)巨大的峰.jpg
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
是55min設(shè)置為100:0
，
不影響你的結(jié)果就別管了
可能是柱子臟了，梯度中設(shè)置沖洗程序，試一下
應(yīng)該是有雜質(zhì)引起的，得排除下是哪里出現(xiàn)的，換下b再試試
這個(gè)峰可能是前面一針或幾針的殘留。判斷依據(jù)是這個(gè)峰較胖，比前后的小峰都胖，此外這個(gè)峰后還有很多小峰，說(shuō)明很大概率很多雜質(zhì)沒(méi)有洗脫出來(lái)。此外，等度洗脫，強(qiáng)度不夠。
是不是色譜柱有吸附啊，換色譜柱試試呢