求大佬,需要設(shè)計引物對目的基因全長擴增
各位大佬,我已提取了質(zhì)粒,我需要重新構(gòu)建表達(dá)載體進(jìn)行原核表達(dá),打算購買試劑盒。但是,現(xiàn)在需要以質(zhì)粒為模板進(jìn)行PCR擴增,我需要設(shè)計引物,但是我用 primer 5 設(shè)計的正反引物(都從頭開始擴增)所顯示的結(jié)果都不好,沒法用,有沒有其他辦法能夠擴增出我的基因全長。急需大佬指導(dǎo)
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各位大佬,我已提取了質(zhì)粒,我需要重新構(gòu)建表達(dá)載體進(jìn)行原核表達(dá),打算購買試劑盒。但是,現(xiàn)在需要以質(zhì)粒為模板進(jìn)行PCR擴增,我需要設(shè)計引物,但是我用 primer 5 設(shè)計的正反引物(都從頭開始擴增)所顯示的結(jié)果都不好,沒法用,有沒有其他辦法能夠擴增出我的基因全長。急需大佬指導(dǎo)
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你目的基因多長?如果是長片段的最好用長距離PCR專用的酶和緩沖液
我都是直接在基因兩端取18~25bp長度設(shè)計引物,我的基因都擴出來了
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