求大佬，需要設(shè)計(jì)引物對(duì)目的基因全長(zhǎng)擴(kuò)增
各位大佬，我已提取了質(zhì)粒，我需要重新構(gòu)建表達(dá)載體進(jìn)行原核表達(dá)，打算購(gòu)買試劑盒。但是，現(xiàn)在需要以質(zhì)粒為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，我需要設(shè)計(jì)引物，但是我用 primer 5 設(shè)計(jì)的正反引物（都從頭開始擴(kuò)增）所顯示的結(jié)果都不好，沒法用，有沒有其他辦法能夠擴(kuò)增出我的基因全長(zhǎng)。急需大佬指導(dǎo)
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快來(lái)大佬哇
解決了嗎？
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，
蹲一個(gè)后續(xù)
軟件設(shè)計(jì)要求很高，挑幾對(duì)評(píng)分高的擴(kuò)擴(kuò)試試，有雜帶就切膠
換高保真酶和pcr儀器試試 這兩個(gè)因素也很重要