his蛋白掛柱效率低
C端6xhis蛋白(108kda)純化時(shí),使用GE的6FF樹(shù)脂,載量為每毫升樹(shù)脂載40mg標(biāo)簽蛋白,確定不過(guò)載。
且質(zhì)粒測(cè)序結(jié)果正確,ORF框及his標(biāo)簽均正確。
嘗試將his標(biāo)簽增加至10his,或在N端再添加
6xhis后,仍在流出液中有大量目的蛋白存在。
改變上柱的粗酶液的濃度及上樣標(biāo)簽蛋白量也沒(méi)能改善
求助該如何解決呢
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
氯化鈉濃度提高到1-1.5M
另外你需要搞清楚你標(biāo)記的那條帶到底是不是你的目的帶。與目的帶大小一致不一定是目的帶,也可能是菌體蛋白。
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