amp抗性菌發(fā)酵
amp抗性菌發(fā)酵過程中會(huì)產(chǎn)生內(nèi)酰胺酶，是抗生素降解，會(huì)使發(fā)酵液中抗生素濃度降低，不含質(zhì)粒的菌株瘋長(zhǎng)或拷貝數(shù)降低，導(dǎo)致重組蛋白濃度降低，請(qǐng)問有什么好的解決辦法嗎
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
可以用卡那抗性的質(zhì)粒，或者換成羧卞就好了
由于amp是β內(nèi)酰胺類抗生素，其作用機(jī)理跟kana等抗生素不一樣，它的內(nèi)酰胺環(huán)會(huì)被質(zhì)粒amp抗性基因表達(dá)的酶切割斷裂，從而水解amp，使帶抗性基因的細(xì)胞得以存活。對(duì)于搖瓶低密度表達(dá)，amp的量足夠，所以還好。但要是上罐發(fā)酵，菌體密度大，加入的amp被水解消耗，可能導(dǎo)致質(zhì)粒丟失、污染等情況，雖然可以通過補(bǔ)加amp的措施補(bǔ)救，但由于不好監(jiān)控，且對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)以及不同批次的重復(fù)性等等都會(huì)產(chǎn)生影響，所以不推薦這么干。最方便的就是改質(zhì)粒抗性。另外，如果是制藥，中國(guó)藥典是明確規(guī)定發(fā)酵不得使用內(nèi)酰胺類抗生素的。
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