我用PKC1139質(zhì)粒進行屬間接合轉(zhuǎn)移，三個多月了都沒有結(jié)合子生長不知道是什么問題呀�，F(xiàn)在在進行條件摸索和體系建立。
就是孢子過濾洗脫后40℃，45℃，50℃，55℃這幾個條件熱激10分鐘后，28攝氏度震蕩培養(yǎng)2.4.6小時后，與生長到OD600=0.4-0.5的大腸桿菌1:1混合以后涂在含有20毫摩爾氯化鎂的MS培養(yǎng)基上，放置16.18.20.22小時后涂相應(yīng)萘啶酮酸和安普霉素，抗生素濃度都是做過敏感性實驗的應(yīng)該沒問題，但是一直沒有結(jié)合子生長，是我操作有問題還是這個質(zhì)粒在我的菌體里不實用呀做過的小伙伴幫我看一下啦

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