求助各位蟲友們，我的畢赤酵母GS115+載體ppic9k，蛋白大小不到20kD，前面的步驟都做的沒問題，也進(jìn)過核酸電泳驗(yàn)證過了，可是到了蛋白表達(dá)這一步，就是不表達(dá)…

跑蛋白電泳

1，濃度太低，直接跑基本沒東西。試過TCA和PEG濃縮之后，條帶與空白對照沒有相應(yīng)條帶。

2，經(jīng)過鎳柱純化之后基本沒有了…這樣應(yīng)該就是沒有表達(dá)出來了。也用考馬斯檢測的試了一下，基本藍(lán)色程度很低，說明蛋白不多。

基本新手，實(shí)驗(yàn)室沒有人做過相應(yīng)的內(nèi)容，問了很多朋友，但是做的東西不太一樣，想請教一下朋友們這下要怎么辦呢，感激不盡

ps：調(diào)整pH的方法還在做，周期較長，換菌種載體什么的也不太清楚是否可以表達(dá)…

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