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liutiefes木蟲 (小有名氣)
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[求助]
求教各位前輩關(guān)于Sephadex LH-20 (氯仿-甲醇1:1)的使用方法 已有3人參與
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| 求教，各位前輩，用凝膠Sephadex LH-20 (氯仿-甲醇1:1)時，一般流速開多少秒合適，每次大約接多少毫升？我們實驗室的凝膠柱大概高150cm,內(nèi)徑1cm,每上樣一次的周期大概多長時間算正常？（總是感覺，凝膠處理樣品，周期太長，而且點板麻煩，獲得純品的概率又很低，不知道是不是我的方法有誤？） |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
liutiefes: 金幣+8, ★★★★★最佳答案 2016-03-09 07:14:46
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橫截面積：0.78平方厘米 柱體積117.75立方厘米（ml）這個柱料的最大線性流速是720cm/h，你柱子最大體積流速就是9.36ml/min.使用流速一般3分之一最大流速。 所以流速可以開到3ml/min,跑完整個柱子周期40min左右。你用的正向洗脫。若要分離效果好，要分離的物質(zhì)建議先濃縮，在上樣，上樣體積控制在10ml以內(nèi)會比較好。 每次接多少，要看你分離的啥物質(zhì)，樣品都含啥物質(zhì)，雜志，目標的含量比例怎么，這個你要慢慢試試，建議先1ml吧。然后分開了，在檢測，把同一物質(zhì)集合起來。祝順利。 |
2樓2016-02-29 11:19:40
3樓2016-02-29 14:48:00
youyuanwin
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4樓2016-02-29 16:05:59
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