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水石孤人新蟲 (初入文壇)
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[求助]
G+細(xì)菌提取基因組，拖帶，260/280一直在2.00。求指教
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原來發(fā)帖要金幣，我還去領(lǐng)了兩個才夠發(fā)個帖子。而且不知道怎么給，同時也請指導(dǎo)！ 1.破壁：液氮研磨，溶菌酶處理過夜都用過。+600μL裂解液。 2.+20μLRNase(10毫克每毫升)，37℃，30min。 3.140μL 5M Nacl，4℃，5min。 4.12000rpm,4℃，10min。 5.+等體積苯酚：氯仿：異戊醇（25：24：1），充分混勻，靜置5min。 6.12000rpm,4℃，10min。 重復(fù)5、6直至抽提界面無沉淀。 7.+等體積氯仿，12000rpm,4℃，10min。 8.+2倍體積無水乙醇，-20攝氏度，過夜。 9.12000rpm,4℃，10min。吸干殘留液體。 10.75%乙醇洗滌兩次，吸干殘留液體。 11.吹干。 12.TE緩沖液溶解。 13.0.8%凝膠電泳，80V。 1號泳道 ：Marker 2K plus。6號泳道：Marker HindⅢ 問題：①一直有拖帶。 ②260/280一直都在2.0左右，膠圖下面RNA部分很亮。 20160225.png |
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fudan671
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3樓2016-02-27 07:32:19
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2樓2016-02-27 00:50:49
水石孤人
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4樓2016-02-27 08:41:19
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