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ACGGOD銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
求。。對(duì)硝基苯酚法測(cè)磷酸酯酶酶活的方法 已有1人參與
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| 對(duì)硝基苯酚法測(cè)磷酸酯酶酶活的時(shí)候，對(duì)硝基苯酚的標(biāo)準(zhǔn)液的制備的時(shí)候，需要保持和樣品液一樣的PH嗎，還是說，只要用水就可以了。 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
ACGGOD(sytucom代發(fā)): 金幣+5, 感謝應(yīng)助，希望繼續(xù)關(guān)注樓主回復(fù)，謝謝 2016-03-31 23:21:00
sytucom: 金幣+1, 回帖精彩，謝謝參與 2016-03-31 23:21:05
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sytucom: 金幣+1, 回帖精彩，謝謝參與 2016-03-31 23:21:05
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給你一個(gè)參考： 方法： 配制p-NPP底物溶液（0.09mg/L)和p-NP標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.03mg/L)；將p-NP標(biāo)準(zhǔn)溶液用無水乙醇溶液稀釋成適當(dāng)?shù)奶荻�，加�?mL0.5mol/L的三氯乙酸混合，再加入15mL0.5mol/L NaOH調(diào)pH值，直至pH值與加酸前一致，分別測(cè)定吸光度，繪制吸光度-濃度關(guān)系曲線。 取4mLp-NPP底物溶液，37℃預(yù)熱5min后加入1mL酶液，反應(yīng)10min后立即加入5mL0.5mol/L的三氯乙酸混合均勻，放置5min終止反應(yīng)，再加入15mL0.5mol/L NaOH調(diào)pH值，直至pH值與反應(yīng)前一致（將1mL去離子水替換1mL酶液，其他條件不變，即得空白），于410nm測(cè)定吸光度。對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線算出生成的對(duì)硝基苯酚濃度，進(jìn)而計(jì)算出酶活力。 注釋：?jiǎn)挝籱g/L可能有問題，主要是看看方法。 來源http://wenku.baidu.com/link?url= ... c4y7tVIyS4RXeCDlgBi |
2樓2016-02-27 10:40:27
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