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蓬山遠(yuǎn)音金蟲 (小有名氣)
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[交流]
大腸桿菌OD值越搖越低 已有2人參與
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| 用大腸桿菌表達(dá)蛋白，培養(yǎng)基是TB，第一次測OD值0.71，過了十分鐘后再測變成了0.34，聽師兄師姐們說是溶菌，這是怎么回事，請各位大神賜教！小女子感激不盡�。ㄍ斡肔B培養(yǎng)基搖的菌沒有問題） |
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應(yīng)該是噬菌體污染導(dǎo)致菌體自溶，在進(jìn)行搖瓶或中小試嘗嘗會出現(xiàn)這些問題，而且這種自溶的菌液不要隨意傾倒，盡量經(jīng)過熱處理后專門處理。如果沒有下游大批量發(fā)酵生產(chǎn)，那么可以簡單換一個正確轉(zhuǎn)化子進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)，或者重新轉(zhuǎn)化。當(dāng)然溶菌現(xiàn)象有一定隨機(jī)性，和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境有關(guān)，盡量避免噬菌體污染需要注意:維持實(shí)驗(yàn)室整潔；構(gòu)建好的克隆質(zhì)�？梢栽�90°煮半小時，再轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞；驗(yàn)證正確的克隆，在進(jìn)行搖瓶表達(dá)前，甘油管轉(zhuǎn)接到最后搖瓶，可以不加抗性。祝好！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-02-28 20:44:01
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| 信息太少，在搖搖看看。還有測的過程中的誤差，在搖搖看看，收集更多的數(shù)據(jù)在分析。祝順利 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
蓬山遠(yuǎn)音3樓2016-02-29 10:39:34
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6樓2016-03-01 22:47:17
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7樓2016-03-01 22:47:44
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8樓2016-03-01 23:12:11
9樓2016-03-03 19:49:39
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