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[交流]
用質(zhì)譜去檢測組蛋白修飾中遇到的蛋白衍生化的問題！
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課題需要用LC-MS/MS去檢測組蛋白上的修飾位點，查看各種文獻后都提到要在酶解消化前對組蛋白進行衍生化處理，所用的衍生化試劑基本也都是丙酸酐，但是在操作過程中發(fā)現(xiàn)，用丙酸酐去衍生化組蛋白時會產(chǎn)生大量的鹽，而這些鹽通過除鹽柱又很難除干凈，導致上質(zhì)譜時很容易弄臟柱子，甚至是質(zhì)譜儀，有沒有大神在這方面有經(jīng)驗的，指點一下，不勝感激�。�！ 我用的衍生化方法是 丙酸酐：甲醇=3：1 混合，隨后按 組蛋白質(zhì)量：混合后試劑體積=1：4 反應，用氨水調(diào)pH至8，51度水浴反應20分鐘。 |
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