[交流] 在所有條件都已經(jīng)摸索好的情況下，我的pcr總是出不來(lái)呢已有10人參與

» 猜你喜歡

蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體已經(jīng)有0人回復(fù)
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)? 已經(jīng)有287人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千” 已經(jīng)有0人回復(fù)
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI” 已經(jīng)有0人回復(fù)
納米粒度分析已經(jīng)有3人回復(fù)
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京已經(jīng)有0人回復(fù)
留學(xué)--博士招生已經(jīng)有15人回復(fù)
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限已經(jīng)有4人回復(fù)

nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything

1樓 2016-03-12 14:23:52

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

回帖支持 ( 顯示支持度最高的前 50 名 )

原海亮

木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

應(yīng)助: 232 (大學(xué)生)
金幣: 4607.4
散金: 3521
紅花: 33
帖子: 1804
在線: 375.4小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 1392705
注冊(cè): 2011-09-06
性別: GG
專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)

★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

你這個(gè)看著目的條帶還是比較明顯的了，拖帶可能是模板降解，或者pcr體系的成分有污染，建議重新制備模板，引物如果有新的盡量重新溶解。如果實(shí)驗(yàn)緊急，這個(gè)可以延長(zhǎng)跑膠時(shí)間，把目的條帶切膠回收，繼續(xù)下一步實(shí)驗(yàn)，同時(shí)一邊進(jìn)行pcr產(chǎn)物重新制備，祝好！

發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端

天空才是極限，我有信心飛的更高！

3樓2016-03-12 17:17:27

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

笑面佛008

新蟲(chóng) (小有名氣)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 347.5
散金: 50
紅花: 1
帖子: 56
在線: 12.1小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 957638
注冊(cè): 2010-02-23
專業(yè): 水產(chǎn)資源與保護(hù)學(xué)

建議提高退火溫度試試。

發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端

4樓2016-03-12 18:45:54

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

prthefu

木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

應(yīng)助: 20 (小學(xué)生)
金幣: 2573.9
散金: 81
紅花: 14
沙發(fā): 1
帖子: 1551
在線: 187小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 3083070
注冊(cè): 2014-03-24
性別: MM
專業(yè): 生物海洋學(xué)與海洋生物資源

引用回帖:

3樓: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-12 17:17:27
你這個(gè)看著目的條帶還是比較明顯的了，拖帶可能是模板降解，或者pcr體系的成分有污染，建議重新制備模板，引物如果有新的盡量重新溶解。如果實(shí)驗(yàn)緊急，這個(gè)可以延長(zhǎng)跑膠時(shí)間，把目的條帶切膠回收，繼續(xù)下一步實(shí)驗(yàn)， ...

你是高手啊，為什么每次解答都挺詳細(xì)的，而且，對(duì)于我這個(gè)比較笨的人來(lái)說(shuō)，我居然也可以看懂

nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything

6樓2016-03-12 19:17:05

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

卡維斯

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

應(yīng)助: 147 (高中生)
金幣: 552.9
紅花: 12
帖子: 301
在線: 56.3小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 1477032
注冊(cè): 2011-11-05
專業(yè): 發(fā)育生物學(xué)

★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

PCR實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化好并不意味著所有的實(shí)驗(yàn)可以用這個(gè)條件呦。
引物合成質(zhì)量、降解；模板質(zhì)量、濃度；加樣情況；PCR儀的運(yùn)行狀態(tài)；酶的活性，等等好多的，
建議摸索好的條件盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，長(zhǎng)時(shí)間擱置應(yīng)該重新制備和稀釋所需組分，最好先優(yōu)化下條件。

8樓2016-03-12 19:57:20

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

普通回帖

永恒的微笑

新蟲(chóng) (小有名氣)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
金幣: 429.1
散金: 7
紅花: 1
帖子: 166
在線: 28.6小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 4042423
注冊(cè): 2015-08-29
專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子

★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

原因可能有多種，之一是你樣品降解了，模板濃度不合適，或者引物放久了。。。。。。

發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端

2樓2016-03-12 15:03:12

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

prthefu

木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

應(yīng)助: 20 (小學(xué)生)
金幣: 2573.9
散金: 81
紅花: 14
沙發(fā): 1
帖子: 1551
在線: 187小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 3083070
注冊(cè): 2014-03-24
性別: MM
專業(yè): 生物海洋學(xué)與海洋生物資源

引用回帖:

2樓: Originally posted by 永恒的微笑 at 2016-03-12 15:03:12
原因可能有多種，之一是你樣品降解了，模板濃度不合適，或者引物放久了。。。。。。

引物好像是年前合成的，這樣，算久嗎

nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything

5樓2016-03-12 19:15:50

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

原海亮

木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

應(yīng)助: 232 (大學(xué)生)
金幣: 4607.4
散金: 3521
紅花: 33
帖子: 1804
在線: 375.4小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 1392705
注冊(cè): 2011-09-06
性別: GG
專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)

★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

引用回帖:

6樓: Originally posted by prthefu at 2016-03-12 19:17:05
你是高手啊，為什么每次解答都挺詳細(xì)的，而且，對(duì)于我這個(gè)比較笨的人來(lái)說(shuō)，我居然也可以看懂

...

以前實(shí)驗(yàn)室?guī)W(xué)弟學(xué)妹，這樣問(wèn)題很常見(jiàn)，因?yàn)槲乙彩菍W(xué)識(shí)有限，大概也只能解釋比較簡(jiǎn)單的問(wèn)題，讓他們知道整個(gè)操作的原理，和出現(xiàn)問(wèn)題的可能原因，太難的還是要請(qǐng)高手了，哈哈

發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端

天空才是極限，我有信心飛的更高！

7樓2016-03-12 19:28:43

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

prthefu

木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

應(yīng)助: 20 (小學(xué)生)
金幣: 2573.9
散金: 81
紅花: 14
沙發(fā): 1
帖子: 1551
在線: 187小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 3083070
注冊(cè): 2014-03-24
性別: MM
專業(yè): 生物海洋學(xué)與海洋生物資源

引用回帖:

7樓: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-12 19:28:43
以前實(shí)驗(yàn)室?guī)W(xué)弟學(xué)妹，這樣問(wèn)題很常見(jiàn)，因?yàn)槲乙彩菍W(xué)識(shí)有限，大概也只能解釋比較簡(jiǎn)單的問(wèn)題，讓他們知道整個(gè)操作的原理，和出現(xiàn)問(wèn)題的可能原因，太難的還是要請(qǐng)高手了，哈哈
...

謙虛啦，覺(jué)得你挺有耐心的，挺好····

nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything

9樓2016-03-12 20:32:51

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

hawkinghj

新蟲(chóng) (初入文壇)

應(yīng)助: 4 (幼兒園)
金幣: 89.6
散金: 9
紅花: 1
帖子: 17
在線: 12.8小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 4145816
注冊(cè): 2015-10-15
性別: GG
專業(yè): 生物信息學(xué)

★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

跑膠的時(shí)候用模板做對(duì)照沒(méi)？看看模板是不是被降解