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mahaidong520銅蟲(chóng) (小有名氣)
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請(qǐng)教RT-PCR內(nèi)參基因正常，目的基因起峰晚，什么原因，RNA正常，引物新和成 已有2人參與
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| 請(qǐng)教RT-PCR內(nèi)參基因正常，目的基因起峰晚，什么原因，RNA正常，引物新和成 |
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南宮瑾
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2樓2016-03-14 13:02:16
3樓2016-03-14 13:23:53
【答案】應(yīng)助回帖
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好吧，我以為你做的半定量呢。。起峰晚可能是表達(dá)量比較低。 測(cè)得濃度是cDNA？這個(gè)不用測(cè)吧，反轉(zhuǎn)錄完成后用內(nèi)參基因標(biāo)模板使Ct值一致。按你的操作是稀釋了10倍。 另外擴(kuò)增曲線(xiàn)顯示如果是一個(gè)基因的話(huà)，從內(nèi)參的曲線(xiàn)來(lái)看表明你的cDNA的的起始濃度不一致，建議各樣Ct值差小于0.5。 |
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mahaidong5208樓2016-03-14 18:53:08
mahaidong520
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4樓2016-03-14 15:10:27
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6樓2016-03-14 16:31:01
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7樓2016-03-14 17:44:48
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測(cè)的是rna濃度，反轉(zhuǎn)后沒(méi)有測(cè)，我在想如果把目的基因的濃度增大，那內(nèi)參基因濃度也擴(kuò)大，會(huì)不會(huì)對(duì)起峰有影響 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
9樓2016-03-15 08:44:26
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