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shania1213新蟲 (初入文壇)
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[求助]
如何使單鏈RNA上的巰基保護(hù)基(二硫鍵)斷開,形成巰基,又不影響單鏈RNA的正常折疊
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如題,本人合成了一條單鏈RNA,5’端做了“巰基”修飾,該巰基是以二硫鍵的方式被保護(hù)的,我需要將二硫鍵打開形成巰基,該過程還得不影響單鏈RNA的正常折疊, 常規(guī)做法是用DTT或者三(2-羧乙基)膦。 我下載的一些方法介紹是用三(2-羧乙基)膦反應(yīng)后所得巰基直接置于三(2-羧乙基)膦中保存,但之前的帖子上有人說三(2-羧乙基)膦反應(yīng)過于劇烈,會影響RNA折疊,不知各位大俠是否做過這方面的試驗(yàn)?或者有看到過介紹這方面的文章?有的話可否發(fā)我一份。非常感謝。 另外,我所知道的用DTT解開單鏈核苷酸二硫鍵的方法都很繁瑣,請教各位大俠,有無即方便,又效率高的方法? 本人不甚感激 |
木蟲 (小有名氣)
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