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靜靜の零?y鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
鋪在六孔板里的細(xì)胞總是莫名死亡破碎，求指點(diǎn)�。。�！ 已有1人參與
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剛做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的小白，這幾天鋪六孔板總是發(fā)生細(xì)胞死亡破碎飄在培養(yǎng)基上的情況。下面貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞狀態(tài)一般，而且是加藥不加藥都出現(xiàn)了這樣的現(xiàn)象。 （1）剛開始加藥的濃度較大，加藥組比對(duì)照組細(xì)胞破碎的現(xiàn)象多，后來濃度降低了十倍，還是所有組別都出現(xiàn)了細(xì)胞破碎的現(xiàn)象，并且加藥和不加藥破碎的都差不多了，個(gè)人覺得可以排除藥物濃度的問題。 （2）加藥之前進(jìn)行了同步化，時(shí)間約為22-24h，同步化結(jié)束更換培養(yǎng)基之前觀察，細(xì)胞狀態(tài)良好，無破碎現(xiàn)象。換液后12h觀察就出現(xiàn)了細(xì)胞破碎現(xiàn)象。且同批未同步化放在培養(yǎng)瓶里培養(yǎng)的細(xì)胞換液后狀態(tài)良好，無破碎現(xiàn)象。會(huì)不會(huì)與同步化時(shí)間過長(zhǎng)產(chǎn)生一定的應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)？ （3）鋪六孔板密度不是特別均勻，中間密度高，周圍稀，會(huì)不會(huì)是因?yàn)橹虚g密度高，長(zhǎng)滿了而導(dǎo)致的細(xì)胞破碎？ （4）藥物本身可能有一定的促凋亡作用，但是不給藥組也出現(xiàn)這樣的現(xiàn)象不能理解？ 求各位大神指點(diǎn)�。。�！ |
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Galina0309
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2樓2016-03-16 13:27:32
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
靜靜の零?y: 金幣+3, ★★★很有幫助 2016-03-16 22:50:22
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
靜靜の零?y: 金幣+3, ★★★很有幫助 2016-03-16 22:50:22
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1、鋪板前PBS浸潤(rùn)6孔板，制成細(xì)胞懸浮液，然后加入平鋪就好 試試 2、6孔板換液時(shí)注意細(xì)胞外露 減少液體沒有時(shí) 細(xì)胞暴露時(shí)間 細(xì)胞會(huì)干了的 操作臺(tái)風(fēng)大啊 肯定掛掉類 3、正常情況細(xì)胞狀態(tài)差也會(huì)有些漂浮 其實(shí)不影響實(shí)驗(yàn) 4、調(diào)整細(xì)胞狀態(tài)鋪板 飽滿 正常 健康 |
3樓2016-03-16 15:53:37
靜靜の零?y
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4樓2016-03-16 22:52:04
Galina0309
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5樓2016-03-17 13:42:07
6樓2018-03-29 20:51:39
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
7樓2018-11-11 15:02:13
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