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[求助]
誘導(dǎo)時(shí)可否降低溫度增加時(shí)間？ 已有2人參與
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目前使用bl21 codon plus菌株，該菌株要使用氯霉素和卡那霉素兩種抗生素，第一次誘導(dǎo)沒有經(jīng)驗(yàn)，細(xì)菌轉(zhuǎn)接后長的比一般的菌慢，由于時(shí)間不夠所以在od0.5不到就加了誘導(dǎo)劑，western結(jié)果顯示蛋白是包涵體，但是可能是誘導(dǎo)劑加的早了導(dǎo)致菌量不夠，但是菌實(shí)在長的慢，又沒法大半夜的做實(shí)驗(yàn)，想過夜誘導(dǎo)，所以過夜誘導(dǎo)是不是應(yīng)該適當(dāng)降低溫度？IPTG的濃度要不要適當(dāng)增加？目前IPTG用的是0.1mM 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2016-03-18 08:34:40
3樓2016-03-19 11:35:52
原海亮
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 232 (大學(xué)生)
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- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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菌體生長慢，我們一般不加抗，然后可以加大轉(zhuǎn)接量，我們一般也是誘導(dǎo)過夜，從二十到三十七度都用過，主要是看不同的蛋白了，祝好！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-03-19 12:28:40
5樓2016-03-23 14:19:49
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