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[交流]
細(xì)胞EGFR的WB 已有3人參與
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最近在做細(xì)胞中EGFR的WB，該細(xì)胞質(zhì)譜分析確定表達(dá)EGFR，用單抗藥物做一抗，抗人源二抗，電泳和轉(zhuǎn)膜都沒問(wèn)題，顯影結(jié)果卻沒有目標(biāo)條帶；一抗過(guò)夜敷，二抗1h，洗膜都是5‘x3次，TBS-T ：tris 0.05M，NaCl 0.9%，pH7.5，吐溫-20 1：2000，做了好多次，老是出不來(lái)，背景全白或全黑，要么有時(shí)出有時(shí)不出 |
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3樓2016-03-21 12:32:52
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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2樓2016-03-20 21:29:59
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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一看就知道，轉(zhuǎn)膜沒轉(zhuǎn)好，全白全黑是你沒曝光好，，，轉(zhuǎn)膜絕對(duì)不能有氣泡，所有的轉(zhuǎn)膜用的大小都要濕濕的滴下來(lái)更好啊，上圖 WB原理步驟FAQ： http://www.detaibio.com/material-western-blot.html |
4樓2016-03-22 10:55:44
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