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培養(yǎng)基的保存方法
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已經(jīng)滅菌完畢的培養(yǎng)基從高壓滅菌鍋中取出后，立即放在平整的臺面上，若大批量生產(chǎn)可用果箱裝好并標(biāo)記好其用選后，送到接種室，讓其自然冷卻凝固。滅好的培養(yǎng)基最好經(jīng)過3d的預(yù)培養(yǎng)，以便觀察培養(yǎng)基是否徹底滅菌，這樣能夠使某些因為沒有徹底滅菌的培養(yǎng)基，在接種前被檢出，可避免雜菌污染而造成不必要的損失，這點對少而重要的材料尤其值得注意。但是在同等條件下經(jīng)多次使用無污染后，就沒必要再擺3d后才使用，而是冷卻凝固后就可使用了。 我們公司（杭州睿凱干細(xì)胞生物科技有限公司http://www.stemcells-cn.com/shouye-267410.html）在生產(chǎn)全合成細(xì)胞培養(yǎng)試劑（http://www.stemcells-cn.com/chanpinzhongxin-244374.html）時用的培養(yǎng)基保存方法如下： (1)防塵 已經(jīng)滅好菌的培養(yǎng)基要注意防塵。如果培養(yǎng)基在衛(wèi)生條件差的地方貯存，依附在塵埃中的細(xì)菌、真菌等會落在培養(yǎng)瓶表面，使用前若不進(jìn)行表面滅菌處理，在接種時就容易隨著氣流進(jìn)入容器，使其受到污染，影響組織培養(yǎng)工作的順利進(jìn)行，因此培養(yǎng)基必須放在干凈、衛(wèi)生的接種室內(nèi)。 (2)避光 備用培養(yǎng)基應(yīng)貯于光線較暗的房子里面，因為吲哚乙酸等某些物質(zhì)易見光分解。在光照下，一些培養(yǎng)基添加物的成分也會發(fā)生變化。在接種室里掛上較厚的窗簾或在培養(yǎng)基的箱子上加蓋厚的黑布，這樣可以使培養(yǎng)基免受光線的影響。 (3)恒溫 培養(yǎng)基冷卻后，可以將其放在10℃左右的冰箱中貯藏3～5周；在大批量生產(chǎn)中可以放在裝有空調(diào)的接種室內(nèi)，擺放2周左右，溫度控制在20℃以內(nèi)；若擺放時間為2～5d，溫度不超過28℃即可。但是在培養(yǎng)基擺放過程中溫度不應(yīng)過高，同時還應(yīng)避免溫度有較大幅度的變化，隨著貯藏室氣溫的升高或降低，裝有培養(yǎng)基容器內(nèi)的空氣會跟著膨脹或縮小，帶來菌類進(jìn)入培養(yǎng)基，造成貯藏期間培養(yǎng)基的大量污染。 (4)定期更新 培養(yǎng)基不宜長期貯存，特別是固體培養(yǎng)基。隨著時間的推移，培養(yǎng)基里的水分以氣態(tài)選出，培養(yǎng)基的含水量便逐漸降低，使培養(yǎng)基的濃度和理化性狀發(fā)生改變，對以后的外植體培養(yǎng)或植株的繼代轉(zhuǎn)接及生根培養(yǎng)均不利；培養(yǎng)基貯存過長，空氣中夾雜的細(xì)菌、真菌也可能降落到培養(yǎng)基表面引起污染；當(dāng)貯藏含有吲哚乙酸、椰乳等物質(zhì)的培養(yǎng)基時，環(huán)境中的光線會使吲哚乙酸發(fā)生光解，也會使椰乳所含的一些成分發(fā)生變化。因此結(jié)合生產(chǎn)任務(wù)做好培養(yǎng)基的配制和使用計劃十分必要，一般情況下培養(yǎng)基貯存時間不應(yīng)超過1周。  |
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