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Amyliu1993新蟲 (小有名氣)
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[求助]
急！在做DNA催化自組裝時(shí)如何避免莖環(huán)結(jié)構(gòu)都自助裝
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如題，做了一個(gè)月的CH感覺背景老是降不下去，該怎么辦啊 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2016-03-19 16:18:59
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3樓2016-03-21 00:05:17
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擴(kuò)增就會產(chǎn)生非特異信號這個(gè)問題發(fā)夾根本不可能解決。最常用的核酸擴(kuò)增技術(shù)是什么，PCR吧不。PCR擴(kuò)增都還有假陽性的產(chǎn)生,每次擴(kuò)增效率都不一樣吧。CHA這種反應(yīng)對循環(huán)的核酸結(jié)構(gòu)要求太高了，可能產(chǎn)生很多副反應(yīng)。試問，你如何能確定你做的核酸是你要的發(fā)夾結(jié)構(gòu)，這一點(diǎn)都無法證明，那非特異信號自然降不下來。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-03-21 14:10:02
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再說你說的倆個(gè)發(fā)夾組裝的問題。兩個(gè)發(fā)夾本身是會發(fā)生組裝的。只不過組裝的速率很慢，你加入觸發(fā)鏈相當(dāng)于加入了催化劑，提高了反應(yīng)速率。當(dāng)然加熱也是這個(gè)道理。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2016-03-21 14:18:48
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如何避免兩個(gè)發(fā)夾反應(yīng)，可以從反應(yīng)溫度和序列設(shè)計(jì)兩方面考慮。具體的操作相信你自己能搞定。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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Amyliu19936樓2016-03-21 14:21:58
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7樓2016-03-21 19:21:26
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8樓2017-03-22 00:29:04
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