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newbous鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
骨髓細(xì)胞原代培養(yǎng)污染
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如圖所示，用直接取骨髓細(xì)胞做原代培養(yǎng)，培養(yǎng)基是R10，操作過程如下：斷頸處死小鼠——75%乙醇浸泡10min——超凈工作臺(tái)取出大小骨，浸泡于75%乙醇中約5min——移步生物安全柜，滅菌PBS清洗5次——剪斷骨頭兩端，一次性注射器吹出骨髓——1200rpm離心4min——去上清，1mlACK消化1min，5mlPBS終止消化——1200rpm，5min——1mlR10培養(yǎng)基重懸，200目細(xì)胞篩過濾獲得單細(xì)胞——流式計(jì)數(shù)——200000/ml種植于培養(yǎng)基中——37℃，5%培養(yǎng)。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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newbous
鐵蟲 (小有名氣)
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2樓2016-03-20 18:52:22
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