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GSH測定方法及原理
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GSH測定方法及原理 測定原理：1MGSH與1M DTNB (二硫代二硝基苯甲酸)反應(yīng)生成黃色產(chǎn)物硫硝基苯甲酸此物質(zhì)在412nm處有最高吸收峰。根據(jù)硫硝基苯甲酸的生成量來計(jì)算GSH的量。 谷胱甘肽：是谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組織成的三肽。其中，半胱氨酸含有一個(gè)巰基（-SH），含巰基化合物可以與DTNB反應(yīng)，斷裂DTNB的二硫鍵產(chǎn)生2-硝基-5-硫代苯甲酸（NTB-） 測定方法：0.05g種子加入1ml 5%的三氯乙酸研磨，10 000g離心10min。取上清液備用。 標(biāo)曲：標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1m M GSH標(biāo)準(zhǔn)溶液 0 0.01 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1m M 標(biāo)準(zhǔn)溶液用5%的三氯乙酸配制 取標(biāo)準(zhǔn)溶液50ul，分別加入520ul 150mM pH為7.8的PBS�；旌暇鶆蚝�，往各管中加入DTNB36ul�；旌虾螅�30℃保溫反應(yīng)5min。測定A412 樣品測定同標(biāo)曲測定方法。 |
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