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yaya0922新蟲 (初入文壇)
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[求助]
基因敲除，sacB負(fù)篩選的問題 已有2人參與
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| 改造的pK18mobsacB質(zhì)粒具有氯霉素和卡那抗性，受體菌具有利福平抗性，進(jìn)行同源重組，得到單交換菌株（具有氯霉素、卡那和利福平抗性），但是單交換菌株在平板上劃線，不知道為什么四區(qū)只長一區(qū)？（劃了兩次都是這樣，沒有單菌落）。在LB中（含利福平）搖菌大約20h，涂到5%蔗糖培養(yǎng)基上，原液一片片的，像層膜，但10-1，,10-2，10-3未長，應(yīng)該怎么辦？ |
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已經(jīng)有2人回復(fù)
3樓2016-03-27 14:05:03
2樓2016-03-27 14:02:32
4樓2016-03-27 14:05:59
yaya0922
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 689
- 散金: 23
- 帖子: 46
- 在線: 15.4小時(shí)
- 蟲號: 3371825
- 注冊: 2014-08-18
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
送紅花一朵 |
我做的這個(gè)菌要加氯化鈉。以前做的這個(gè)菌其他基因敲除做出來過，當(dāng)時(shí)得到許多回復(fù)突變的，說明sacB還是起作用了。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
5樓2016-03-27 17:39:30
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