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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 轉化后不表達
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kissyubo新蟲 (初入文壇)
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轉化后不表達 已有1人參與
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用DH5菌第一次做表達PET質粒，提出的質粒濃度較低，接著第二次用DH5菌做PETX-4T和BL21菌做PGE質粒的表達，第二次轉化后含抗性的平板根本就不長菌，第三次重復第二次的，結果還是一樣的。其中過程都很仔細，可是就是轉化后平板上不長菌？這是為什么呢？我懷疑第一，菌有問題。但是菌有問題這個怎么解決？如何鑒定呢？第二，氨芐抗性的問題，可能氨芐失效了。但是本寶寶的氨芐青霉素是新配的，而且0.22濾膜過濾了。第三操作問題，這個問題，為什么第一次做轉化就成功了呢？而且跑電泳條帶看起來還不錯，怪就怪寶寶一時沖動，把所有東西都清洗了，沒有留下一點痕跡。求大神指導。問題出在哪里？  |
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kissyubo
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3樓2016-03-28 21:24:19
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2樓2016-03-27 16:47:11
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