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feiadafeng銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
MTS實(shí)驗(yàn)，MTS不變色 已有1人參與
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最近進(jìn)行懸浮Daudi細(xì)胞的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)，購買了Promega的MTS 250 mg。 稱取80mg溶于Hyclone 的PBS里，發(fā)現(xiàn)2mg/mL的濃度下仍有大量粉末未溶解。溶液呈現(xiàn)金黃色。避光超聲并置于室溫約4小時(shí)仍無改善。補(bǔ)加PBS至約50mL后0.22um濾膜過濾，感覺并未出現(xiàn)堵膜的情況。隨后避光保存在-20度下。 使用時(shí)100uL培養(yǎng)基加20 uLMTS， 37度4小時(shí)，但是無論陰性對(duì)照還是陽性對(duì)照都是金黃色，也就是MTS沒有明顯變色。鋪板前已確認(rèn)細(xì)胞生存率>90%，每孔10000個(gè)細(xì)胞，培養(yǎng)基正常，培養(yǎng)箱內(nèi)同批細(xì)胞生存率>85%生長(zhǎng)曲線正常，而且同批MTS 與9.6*10^6的細(xì)胞混合會(huì)明顯變色成偏血清的顏色。 綜上所述，似乎并不是細(xì)胞死了或者M(jìn)TS失效的問題，但不清楚為何MTS不變色。濃度是略低于2mg/mL，但是否影響這么大？ 希望大家如果有經(jīng)驗(yàn)的話指正一下或者解釋一下，謝謝~ |
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金蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 微生物學(xué)
2樓2016-08-04 10:07:57
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