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rola234新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
加了信號(hào)肽的全長(zhǎng)跨膜蛋白能分泌表達(dá)嗎？
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| 最近要發(fā)酵一個(gè)膜蛋白，因?yàn)樘腔稽c(diǎn)比較多，而且二硫鍵也不少，因此準(zhǔn)備用的是哺乳動(dòng)物細(xì)胞CHO表達(dá)系統(tǒng)，我的膜蛋白是TNF受體家族的一個(gè)成員，胞外區(qū)不是很大，跨膜區(qū)也很小，大概只有23個(gè)氨基酸，有α螺旋的結(jié)構(gòu)，屬于三型跨膜蛋白，主要結(jié)構(gòu)都在胞內(nèi)區(qū)。我想發(fā)酵全長(zhǎng)蛋白，用SingalP 4.1分析了一下氨基酸序列，發(fā)現(xiàn)并沒(méi)有信號(hào)肽，因此加了一個(gè)20個(gè)氨基酸的信號(hào)肽序列上去，構(gòu)建已經(jīng)做完了。那么問(wèn)題來(lái)了，如果沒(méi)加信號(hào)肽的全長(zhǎng)蛋白有可能卡在細(xì)胞膜上，那加了信號(hào)肽的全長(zhǎng)蛋白有木有可能分泌表達(dá)�。窟�是在出核的過(guò)程中也極有可能卡在細(xì)胞膜上？求教。。 |
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zjhsoda
新蟲(chóng) (初入文壇)
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2樓2018-10-10 16:48:15
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