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crisergioni新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求各位幫忙看看家兔α顆粒膜蛋白（GMP-140）含量測定的96孔板數(shù)據(jù)分析
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由于實(shí)驗(yàn)做得比較久了，步驟原先沒有記全，不清楚這些吸光度到底代表的是什么，希望大神能解答一下。當(dāng)時(shí)做實(shí)驗(yàn)也比較水。。就是跟著步驟做了一次，對ELISA也不是特別了解，望大家能詳細(xì)點(diǎn)解釋~比如加一個(gè)樣品是豎著加還是橫著加，哪幾個(gè)孔是代表同一樣品的不同稀釋濃度。真心都不懂。。 一下是96孔板的吸光度數(shù)據(jù)： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 1．345 0.034 0.031 0.032 2.76 2.597 2.248 0.998 0.706 0.315 0.034 0.034 B 1.327 0.035 0.032 0.033 2.141 2.607 2.251 1.174 0.705 0.317 0.034 0.044 C 1.365 0.032 0.033 0.032 2.672 2.572 1.385 0.729 0.315 0.313 0.034 0.035 D 1.333 0.465 0.56 0.199 0.54 0.321 0.469 0.368 0.7 0.536 0.442 0.042 E 1.355 0.037 0.033 0.033 0.033 0.033 0.033 0.035 0.033 0.034 0.034 0.035 F 1.352 0.042 0.039 0.04 0.039 0.043 0.038 0.037 0.038 0.04 0.04 0.041 G 1.347 0.04 0.036 0.035 0.035 0.044 0.033 0.032 0.033 0.034 0.033 0.036 H 1.306 0.044 0.04 0.039 0.037 0.035 0.034 0.032 0.034 0.034 0.035 0.037 一下是加樣步驟，其余的溫育等省略了，步驟就只有這么點(diǎn)。。 1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋 80 ng/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 120 μL的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入120 μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 40 ng/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 120 μL的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入120 μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 20 ng/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 120 μL的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入120 μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 10 ng/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 120 μL的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入120 μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 5 ng/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 120 μL的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入120 μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 2. 將原血漿作為樣品1，浸潤過止血材料的血漿為樣品2 3. 加樣： （1）空白孔：只加顯色劑A、B和終止液，其余相同。 （2）標(biāo)準(zhǔn)品孔：加入標(biāo)準(zhǔn)品50 ul,鏈霉素親和素-HRP 50 ul。 （3）樣品孔：加入樣品40 ul，然后各加入抗GMP-140 抗體10 ul，鏈霉親和素-HRP 40 ul，蓋上封板膜，輕輕震蕩混勻，37 ℃溫育1 h。 這是得出的標(biāo)準(zhǔn)曲線 捕獲.PNG 捕獲.PNG |
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一1、般是最少做兩個(gè)復(fù)孔，用手機(jī)打開的，提供的數(shù)據(jù)順序有點(diǎn)亂，暫時(shí)不做解釋。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-04-28 22:09:10
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3樓2016-04-28 22:09:48
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測完之后說明書上有沒有計(jì)算公式，要按照你稀釋的倍數(shù)去計(jì)算樣品中GMP的含量。不是很習(xí)慣APP的打字，發(fā)的有點(diǎn)多，見諒！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-04-28 22:12:55
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