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可愛多了金蟲 (小有名氣)
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[求助]
羧基磁珠和氨基DNA連接 已有4人參與
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| 各位大俠，我最近在做羧基修飾的磁珠和氨基修飾的DNA連接，由于我是新手，之前沒接觸過，請大俠給一份詳細(xì)的連接步驟，小弟不勝感激 |
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逆流的魚3623
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9樓2016-04-25 16:16:42
yanliang12
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2樓2016-04-15 21:26:27
可愛多了
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3樓2016-04-16 20:41:06
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4樓2016-04-17 10:27:34
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5樓2016-04-18 21:33:18
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
可愛多了: 金幣+5 2016-04-20 10:31:14
可愛多了: 金幣+5 2016-04-20 10:31:14
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先取一定量磁珠溶解在MES buffer中，加入8mgEDC12mgNHS(量可以變，比例最好不變)，超聲3分鐘，37度震蕩15分鐘。（弱酸性環(huán)境中活化羧基） 分離后加入溶解在生理鹽水中的DNA（不用洗滌），37度震蕩1小時。加入封閉液封閉反應(yīng)位點，37度繼續(xù)震蕩1小時。 分離清洗后分散在中性buffer中。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2016-04-19 07:16:43
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7樓2016-04-20 10:39:10
【答案】應(yīng)助回帖
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我的磁珠是100毫克每毫升，每次用15微升。多用少用點沒大關(guān)系。我連的是抗體，終濃度是100微克每毫升。不過原理是一樣的，都是連接羧基和氨基的。檢測是否連上了，可以通過水合粒徑，電位，紅外等表征。最直接的就是實驗現(xiàn)象出來了，那就肯定接上了。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2016-04-20 12:54:21
shenhaiwang
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10樓2016-05-18 11:42:10
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