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qPCR 驗(yàn)證轉(zhuǎn)座子插入后是Knock down 還是 Knock out
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現(xiàn)拿到一批轉(zhuǎn)座子插入的植物(二倍體)突變體, 經(jīng)過基因型鑒定,找出了純合的插入突變體,但是需要驗(yàn)證插入該基因后是Knock down 還是 Knock out, 由于沒有合適抗體,不能從蛋白水平驗(yàn)證.現(xiàn)需要用qPCR來驗(yàn)證,野生型為對照,你覺得設(shè)計(jì)引物從哪里設(shè)計(jì)比較好,還需要注意什么事項(xiàng) 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
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先跨轉(zhuǎn)座子設(shè)計(jì)引物,看能否擴(kuò)出,看轉(zhuǎn)錄是否能越過轉(zhuǎn)座子,mrna是否異常,還可以再在插入位點(diǎn)前面的mrna設(shè)計(jì)引物,看正;虍惓rna表達(dá)如何,這樣即可判斷 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
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